分光光度计的工作原理和分类全解析-易买仪器网

分光光度计的工作原理和分类全解析

上传时间：2026/4/30 9:17:46　来源：易买仪器网　点击：8

一、核心原理

分光光度计的工作基于分光光度法和朗伯-比尔定律。当一束特定波长的光通过样品溶液时，溶液中的待测物质会吸收部分光能。吸收的光量（吸光度）与溶液中物质的浓度和光程长度成正比，即：

A = k × b × c = log(I₀/I)

其中，A为吸光度，k为吸光系数，b为光程长度，c为溶质浓度，I₀为入射光强度，I为透射光强度。通过测定不同波长下的吸光度，可以绘制吸收光谱进行定性分析，也可以通过工作曲线进行定量分析。

二、主要组成部分

1.光源系统：提供连续光谱的光源，根据测量波段选择不同光源。可见光区常用钨灯或碘钨灯，紫外区常用氢灯或氘灯，氙灯可覆盖紫外和可见光区。

2.单色器系统：将光源发出的复合光分解为单色光，常用光栅或分光棱镜实现单色化。

3.样品室：放置待测样品和参比溶液的吸收池，使单色光通过样品溶液，部分光被吸收，剩余光透过。

4.检测系统：接收透过光，将光信号转化为电信号并放大记录，得到吸光度数据。

5.信号处理：计算吸光度，输出定量结果。

三、仪器分类

分类维度	类型	特点与应用
按波长范围	紫外-可见 (UV-Vis)	应用最广，覆盖190-1100 nm，适用于核酸、蛋白质、药物分析。
	可见分光光度计	仅限可见光区，结构简单，用于教学及常规水质检测。
	红外分光光度计	分析分子振动，主要用于有机化合物结构鉴定。
按光路结构	单光束	光路简单、成本低；但易受光源波动影响，适合固定波长定量。
	双光束	实时对比样品与参比，自动扣除背景干扰，稳定性高，适合科研扫描。
	双波长	同时发射两束不同波长光，能有效消除浑浊样品背景，适合复杂基质。